Farelerde Oluşturulan Kronik Deneysel Otoimmün Ensefalomiyelit Modelinde Çözünebilir Epoksit Hidrolaz İnhibisyonunun GPR75/FLC/PI3k/Akt1'e Bağımlı Antiapopitotik Sinyal İleti Yolu Üzerindeki Etkisinin Araştırılması
[ X ]
Tarih
2022
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Bu projede, farelerde miyelin oligodendrosit glikoprotein (MOG)35-55 peptit kullanılarak oluşturulan kronik deneysel otoimmün ensefalomiyelit (DOE) modelinde çözünebilir epoksit hidrolaz (çEH) inhibisyonunun hastalık bulguları üzerindeki yararlı etkisinin mekanizmasının santral sinir sistemi (SSS)'de G proteini reseptörü (GPR) 75/fosfolipaz C (FLC)/fosfoinozitit 3-kinaz (phosphoinositide 3-kinase; PI3K)/Akt1 sinyal ileti yolu aracılıklı enflamasyon, apopitoz, demiyelinizasyon ve remiyelinizasyon ile ilişkilendirilerek araştırılması amaçlanmıştır. Deneylerde 3 gruba ayrılan C57BL/6 dişi farelerin beyin ve omurilik dokuları kullanılmıştır: (1) MOG35-55 peptit (200 ug/fare; 0.1 ml/fare)+pertusis toksin (PT) (400 ng/fare; 0.1 ml/fare)+sodyum fosfat tamponu (SFT) (0.1 ml/fare), (2) MOG35-55 peptit (200 ug/fare; 0.1 ml/fare)+PT (400 ng/fare; 0.1 ml/fare)+dimetilsülfoksit (DMSO) (0.1 ml/fare) ve (3) MOG35-55 peptit (200 ug/0.1 ml/fare)+PT (400 ng/fare; 0.1 ml/fare)+triflorometoksifenil-3- (1-propiyonilpiperidin-4-il)üre (trifluoromethoxyphenyl-3-[1-propionylpiperidin-4-yl]urea; TPPU) (3 mg/kg; 0.1 ml/fare). Doku homojenatlarından hazırlanan süpernatantlarda ß-tübülin, çEH, GPR75, Gaq/11, c-Jun, fosforile c-jun, FLC ß4, PI3K p85a, fosforile PI3K p85a, Akt1, fosforile Akt1, mitojen ile etkinleştirilen protein kinaz (mitogen-activated protein kinase kinase; MEK) 1/2, fosforile MEK1/2, ekstraselüler sinyal ile düzenlenen kinaz (extracellular signal-regulated kinase; ERK) 1/2, fosforile ERK1/2, siklik adenozin monofosfat yanıt elementi bağlayıcı protein (cyclic adenosine monophosphate-response element binding protein; CREB) 1, fosforile CREB1, B-cell lymphoma (Bcl)-2, miyelin proteolipit protein (PLP) ve semaforin (SEMA) 3A proteinlerinin ekspresyonu immunoblotting yöntemiyle ölçülmüştür. TPPU uygulanan farelerin dokularında, SFT ve DMSO gruplarına göre, çEH, GPR75, Gaq/11, c-jun, fosforile c-Jun ile SEMA3A protein ekspresyonunun daha düşük, FLC ß4, fosforile PI3K p85a, fosforile Akt1, fosforile MEK1/2, fosforile ERK1/2, fosforile CREB1, Bcl-2 ile miyelin PLP protein ekspresyonunun daha yüksek olduğu, ayrıca PI3K p85a, Akt1, MEK1/2, ERK1/2 ve CREB1 protein ekspresyonunun değişmediği görülmüştür. Bu bulgular, TPPU ile çEH inhibisyonunun DOE'de görülen hastalık bulgularını azaltıcı etkisine, pro-enflamatuvar GPR75/Gaq/11/etkinleştirici protein-1 sinyal ileti yolu etkinliği ve remiyelinizasyon inhibitörü SEMA3A ekspresyonundaki azalmanın yanı sıra, antiapopitotik FLC ß4/Akt1/MEK1/2/ERK1/2/ CREB1/Bcl-2 sinyal ileti yolu etkinliği ve SSS'de miyelin membranın başlıca bileşeni olan PLP ekspresyonundaki artmanın katkıda bulunabileceğini düşündürmüştür.
Açıklama
01.04.2022
Anahtar Kelimeler
Apopitoz, Çözünebilir epoksit hidrolaz, TPPU, kronik deneysel otoimmün ensefalomiyelit
